UPLC Method Development and Validation for Determination of Timolol Maleate in Ophthalmic Solution = การพัฒนาและทดสอบความถูกต้องของวิธีวิเคราะห์ยาหยอดตาทิโมลอล มาลีเอต ด้วยวิธี UPLC

Napanan Wongthanakitcharoen, Kulthida Ampantong, Banjong Kitirattrakran

Abstract


The method validation for determination of Timolol Maleate in ophthalmic preparation was established using Ultra Performance Liquid Chromatography (UPLC). The separation was achieved on a Acquity UPLC BEH C18 1.7 µm, 2.1 × 100 mm at 40 degree Celsius. The mobile phase was the mixture of phosphate buffer and methanol (65:35) at the flow rate of 0.25 ml per minute with UV detection at 295 nm. Specificity test showed that Timolol maleate peak was not interfered by other peak. The linearity test showed linear relationship between the area under the peak and concentration levels in range of 0.056 to 0.423 mg/ml with coefficient of determination 0.9999. The percentage mean recovery from 3 concentration levels was 98.2 (%RSD = 0.5). The precision test within same day gave %RSD of 0.4 and different days gave %RSD of 1.3. The robustness test indicate that describe method was robust when the chromatographic condition were changed such as composition and column temperature. The quality of Timolol Maleate eye drop 15 samples were sampling from government hospitals in Thailand. The samples were analyzed for identification test, assay of active ingredient, pH and sterility test. All samples passed the specifications.

Key words: Timolol, UPLC

การพัฒนาวิธีวิเคราะห์ปริมาณตัวยาทิโมลอล มาลีเอต ในยาหยอดตา เพื่อให้ใช้ได้กับเครื่องอัลตราเพอร์ฟอร์มานซ์ลิควิดโครมาโทกราฟี พร้อมทั้งทดสอบความถูกต้องของวิธีวิเคราะห์ โดยใช้คอลัมน์ Acquity UPLC BEH C18 1.7 µm, 2.1 × 100 mm ที่อุณหภูมิ 40 องศาเซลเซียส โดยมีสัดส่วนตัวพา ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ และเมทานอล คือ 65:35 อัตราการไหล 0.25 มิลลิลิตรต่อนาที ตรวจวัดที่ความยาวคลื่น 295 นาโนเมตร ผลการทดสอบพบว่าวิธีวิเคราะห์มีความจำาเพาะต่อการหาปริมาณตัวยาทิโมลอล มาลีเอต ความสัมพันธ์เป็นเส้นตรงในช่วงความเข้มข้น 0.056-0.423 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร มีค่าสัมประสิทธิ์การตัดสินใจเท่ากับ 0.9999 การทดสอบความแม่นของวิธีวิเคราะห์ พบว่าร้อยละของการคืนกลับเฉลี่ยเท่ากับ 98.2 และมีค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานเท่ากับ 0.5 การทดสอบความเที่ยงภายในวันเดียวกันมีค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานเท่ากับ 0.4 และต่างวันกันมีค่าเท่ากับ 1.3 วิธีวิเคราะห์มีความทนต่อการเปลี่ยนแปลงสภาวะที่ใช้ทดสอบ คือ การเปลี่ยนสัดส่วนของสารละลายตัวพา และการเปลี่ยนอุณหภูมิของคอลัมน์ ผลการตรวจวิเคราะห์คุณภาพยาหยอดตาทิโมลอล มาลีเอต จำนวน 15 ตัวอย่าง ที่สุ่มจากโรงพยาบาลของรัฐในประเทศไทย ตรวจวิเคราะห์หัวข้อการตรวจเอกลักษณ์ การตรวจปริมาณตัวยาสำคัญ ค่าความเป็นกรด-เบส และการทดสอบความปราศจากเชื้อ พบว่าตัวอย่างทั้งหมดมีคุณภาพเข้ามาตรฐาน

Full Text:

Full Text in Thai


Creative Commons License
This work is licensed under a Creative Commons Attribution 3.0 License.

Bulletin of the Department of Medical Sciences - วารสารกรมวิทยาศาสตร์การแพทย์  ISSN: 0125-684X

Journal Contact